1. 眼科用のハサミなどで細かく砕く。
2. 風袋重量を測定しておいた遠心管に移し組織重量を測定する。
3. 組織重量の４倍量(v/w)の抽出バッファーＢ（下記）を加える。
4. 超音波破砕する。
5. 15,000 xg で５分間遠心、上清を分注して凍結保存する。

抽出バッファー：
抽出バッファーＢ (難溶性タンパク用）
Urea　　　　　　0.30 g
thiourea　　　　0.15 g
20%(w/v) CHAPS　0.10 ml
20%(w/v) SB3-10　0.10 ml
dithiothreitol　　 0.01 g
Pharmalyte 3-10　0.02 ml
これらをMilli-Q 水に溶かし、全量を 1 ml にする。